项目文章 | 江苏省人民医院李建勇教授团队联合新格元利用单细胞技术发现DLBCL联合用药靶点

发布时间：2022-05-10 10:36:12  

弥漫性大B细胞淋巴瘤 (DLBCL) 是一种高度侵袭性的淋巴瘤，在基因组改变、形态学表现、临床特征、治疗反应和预后方面具有很大的异质性。尽管R-CHOP化疗方案显著提高了患者的生存率，但大约30-40%的患者最终会出现复发，这是目前临床迫切需要解决的一个难题。组蛋白去乙酰化酶抑制剂 (HDACi) 具有多种生物学作用如细胞周期停滞、细胞凋亡等，已有一些临床前研究发现其在血液肿瘤中具有一定治疗潜力，但在DLBCL中的临床试验结果不尽如人意。因此，本研究旨在利用单细胞转录组测序（scRNA-seq）技术深入研究HDACi药物压力下DLBCL细胞的克隆演化规律，挖掘耐药核心驱动基因及其作用机制，在此基础上开发和评估新的联合治疗方案。

基于此，江苏省人民医院李建勇、金晖教授团队利用新格元技术平台探索HDACi在DLBCL中的联合用药方案，相关研究成果发表在国际著名期刊Clinical and Translational Medicine（IF：11.492）。在本研究中，作者对不同浓度HDACi-LAQ824作用后的DLBCL细胞系进行了scRNA-seq测序。结果发现c-Fos在较高浓度药物压力下的表达上调，这与DLBCL细胞的异质性增强以及残留肿瘤细胞的存活密切相关；c-Fos作为LAQ824的潜在治疗靶点，其表达水平可作为评估LAQ824药物敏感性的指标，抑制c-Fos的表达能够提高HDACi药物敏感性；监测c-Fos的动态表达水平可能为接受HDACi治疗过程中的DLBCL患者的干预提供早期预警。本项目通过分析DLBCL细胞对于不同HDACi药物浓度下的演化规律，发掘联合用药方案，为实现个体化精准治疗、解决HDACi耐药问题提供理论基础及数据支持。

本课题的第一作者分别为2019级博士王露桥、血液科助理研究员伍紫娟、夏奕主治医师，同时本项目受国家自然科学基金以及国家血液系统疾病临床医学研究中心转化研究课题资助。

图1 LAQ824作用后的DLBC细胞进行scRNA-seq分析

机制图

江苏省人民医院李建勇、金晖教授团队主要研究方向为淋巴增殖性疾病，包括慢性淋巴细胞白血病诊断、鉴别诊断、预后相关因素、发病机制及临床治疗研究。擅长利用多参数流式细胞术、荧光原位杂交技术及分子生物学技术对恶性血液病诊断分型、预后判断、病情监测，并根据患者的临床生物学特征采取个体化治疗策略，处于国际领先水平。新格元生物科技有限公司专注于高通量单细胞多组学平台的自主开发及临床转化，致力于将突破性的单细胞技术应用于科学研究、临床检测、健康管理和药物开发等领域。双方在2020年签署了单细胞测序临床转化战略合作（完美的学术盛宴—金陵单细胞测序临床转化论坛圆满落幕！），目前在血液肿瘤等方向展开深入合作，已启动多项临床相关项目，包括血液病临床诊疗标志物、联合用药方案等，并取得阶段性成果。双方将继续利用各自在精准医学领域的技术储备和优势，多层次、多角度、多组学整合分析血液肿瘤特征，共同促进双方技术、产品与应用的延伸和发展。

此外，在本项课题研究中，作者探究了HDACi在DLBCL中的作用机制并提出了新的联合用药策略；目前小分子抑制剂在血液肿瘤的治疗中发挥着重要作用，而对于揭示其作用和耐药机制，挖掘生物标记物，以及探究潜在的新组合疗法是目前面临的主要挑战，因此亟需开发更好的研究技术手段。新格元推出的AccuraCode™ HTP OneStep RNAseq Kit，一款可一次完成数百种药物处理后细胞RNA捕获及建库的高通量药物筛选试剂盒，可在通量和精度上加速药物筛选进程。以微孔板作为反应载体，AccuraCode™将逆转录(RT)和PCR扩增步骤合并，在高通量PCR板中仅需一步即可高效获得各孔中的cDNA分子。利用该技术平台，双方将进一步开展淋巴瘤相关小分子药物筛选工作，建立大规模候选药物响应的转录组数据库，为血液肿瘤小分子药物作用机理以及新药开发研究提供数据基础，加快后续临床转化进程。

AccuraCode^®技术流程

人物介绍

李建勇教授

博士生导师、博士后合作导师

◆江苏省人民医院浦口慢淋中心、南京医科大学第一附属医院血液科主任

◆南京医科大学A类特聘教授

◆中华医学会血液学分会常委、淋巴细胞疾病学组组长

◆中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会第四届主任委员

◆第五届名誉主任委员、淋巴瘤学组组长

◆中国慢性淋巴细胞白血病工作组组长

◆CSCO中国淋巴瘤联盟副主席

◆中华医学会肿瘤学分会淋巴瘤学组副组长

◆江苏省老年医学会血液学分会主任委员

◆江苏省医师协会血液科医师分会候任会长

◆江苏省医学会血液学分会前任主任委员

◆南京医学会血液学分会主任委员

◆中国医师协会整合血液病学专业委员会副主任委员

金晖教授

江苏省人民医院血液科 副研究员

◆南京医科大学血液学重点实验室 主任助理

◆北京协和医学院，内科学博士

◆南京医学会血液学分会青年委员

◆2011-2013年在美国国立卫生院（NIH）作为访问学者，2015年就职于江苏省人民医院血液科，近年来从事淋巴瘤相关多组学研究，研究方向为利用单细胞测序等多组学手段研究淋巴肿瘤的发生发展和耐药机制，以及相关非编码RNA作为诊断及预后标志物的开发，主持多项国家及江苏省自然科学基金项目。相关工作在国际慢淋工作组会议（iwCLL 2019，2021）口头发言，首次揭示相关circRNA在CLL中作为致癌基因及重要预后标志物，获得美国血液年会（ASH，2019）摘要成就奖。目前已在Leukemia，Molecular Therapy-Nucleic Acid，OncoImmunology，Science Signaling 等杂志发表多篇研究论文，授权国家发明专利2项。 

参考文献

Luqiao Wang,Zijuan Wu,Yi Xia,Xueying Lu,Ji Li,Lei Fan,Chun Qiao,Hairong Qiu,Danling Gu,Wei Xu,Jianyong Li,Hui Jin.Single-cell profiling-guided combination therapy of c-Fos and histone deacetylase inhibitors in diffuse large B-cell lymphoma. Clin Transl Med.2022 May;12(5):e798. DOI: 10.1002/ctm2.798.PMID: 35522945