图3 SIGLEC-1作为单核细胞簇4特异性表面标记物的验证

4、SIGLEC-1+单核细胞在胰岛炎症和1型糖尿病发病中的作用

流式分析了1型糖尿病经典动物模型(NOD鼠)、ICR小鼠外周血和胰腺组织中SIGLEC-1+单核细胞的检出和占比。SIGLEC-1+细胞在所有周龄的ICR小鼠的外周血和胰腺组织中几乎不存在，在6周龄、12周龄、24周龄NOD小鼠外周血中的占比呈现显著下降的趋势(16.88% vs 10.17% vs 5.71%)，而在胰腺组织中占比呈现显著的先升后降的趋势(1.78% vs 23.65% vs 2.87%)。将6周龄NOD小鼠的SIGLEC-1 +单核细胞和SIGLEC-1-单核细胞转移到相同周龄的NOD小鼠和ICR小鼠饲养8周，与NOD小鼠对照相比，接受SIGLEC-1+单核细胞治疗的NOD小鼠有更明显的严重胰岛炎症，且糖尿病发作加速。使用CCR2拮抗剂抑制6周龄NOD小鼠的经典单核细胞募集虽然减少了胰岛素评分为G2/G3的胰岛数量，但在8周的观察期内，糖尿病发病率没有明显差异。

图4 NOD和ICR小鼠SIGLEC-1+单核/巨噬细胞的流式分析

5、LADA患者中单核细胞簇4与其他细胞的相互作用

为了确定LADA患者中单核细胞簇4引发胰岛炎症的机制，对单核细胞簇4与各种细胞类型的潜在互作对进行了分析。与对照组相比，LADA中单核细胞簇4与T细胞和NK细胞的互作更强，主要通过TGFB1-TGFBR3、CD74-COPA、CCL3-CCR5和CXCL8-CXCR1等进行互作。单核细胞簇4通过PLXNB2-Sema4D与T/NK细胞亚群互作。LADA中大多数T和NK细胞亚群通过CCL3L1-CCR1与单核细胞簇4进行互作，而对照组则没有。表明单核细胞簇4与T细胞、NK细胞之间存在广泛的相互作用，这对于LADA患者的胰岛β细胞的破坏至关重要。

图5 细胞子集之间的互作分析

6、SIGLEC-1+单核细胞水平升高作为1型糖尿病发病的潜在生物标志物

流式分析显示，相比2型糖尿病患者及健康对照，LADA患者外周血中SIGLEC-1 +单核细胞占比的中位数显著更高(5.79% vs 1.76% vs 2.04%)。SIGLEC-1 +单核细胞比例与年龄、性别无关，但与疾病活动性呈正相关。病程不超过1年的LADA患者SIGLEC-1+比值明显高于病程较长的LADA患者。此外，GADA水平升高的LADA患者SIGLEC-1+比值显著升高。相比儿童对照组和成人2型糖尿病组，儿童1型糖尿病组SIGLEC-1+比率明显更高，但与成人LADA组无显著差异，表明SIGLEC-1+在1型糖尿病患者群体中的表达模式一致。